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pBr322质粒克隆位点

1.pBR322质粒的构建过程十分复杂,现在常用的质粒构建过程相对简单. 2.pBR322质粒需要加入氯霉素来抑制蛋白质的合成,增加拷贝数.而现在常用的pUC质粒本身就含有一个改进的pMB1复制子并且具有很高的拷贝数. 3.pBR322质粒没有多克隆位点. 4.pBR322质粒相对现在的质粒分子质量较大. 5.pBR322质粒检出有插入片段的重组克隆十分复杂.而pUC质粒使检出有插入片段的重组克隆成为一个但步骤程序.

pBR322没有MCS,但其具有多个单一的限制性内切酶位点,其中7种内切酶的识别位点在四环素抗性基因内部,2种识别位点在这个基因的启动区内,所以9个限制酶切位点插入外源片段可以导致tetr 基因的失活; 另外有3种限制酶在氨苄青霉素抗性基因有单一的识别位点,插入外源片段可导致Ampr失活.pUC质粒载体的优点 :第一, 具有较小的分子量和更高的拷贝数; 仅保留了pBR322的氨苄青霉素抗性基因和复制起点;第二,具有来自大肠杆菌lac操纵子的lacZ'基因,可用于蓝白斑筛选;第三,具有人工构建的多克隆位点MCS区段.方便具有不同粘性末端的外源片断的插入.

pbr322质粒是一种什么样的载体粘粒质粒噬菌体载体种类:质粒、噬菌体、腺病毒载体、逆转录病毒载体 质粒特点: 存在于细菌染色体外的小型环状DNA分子. 具有自我复制功能. 带有抗性基因及表型识别等遗传性标记物. 经改造后具有多

pBR322含有抗四环素基因(Tcr)和抗氨苄青霉素基因(Apr),并含有27种限制性内切酶的单一识别位点

质粒载体pBR322具有两种抗生素抗性基因氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因,可供转化子的选择标记.把连接转化后的菌体培养物涂布在含有氨苄青霉素和四环素抗性的平板上倒置培养12~16h,长出来的单菌落进行PCR验证和酶切验证,验证为阳性的转化子再送去测序确认正确.为什么用单酶切呢?连反了多麻烦啊.

(1)由分析可知,破坏的是青霉素抗性基因,所以用限制酶PstI,而且要保证目的基因和质粒定向连接,所以不能形成相同的黏性末端,故另一种酶选EcoRI酶,将目的基因

基因载体的条件;一、能自主复制或随受体细胞染色体DNA一起复制.二、易于鉴定和筛选.三、限制酶对其作用的切割点少.四、易与引入受体细胞.质粒 是细菌染色体外的小型环状双链DNA,质粒可以自我复制,而且质粒上有多个限制性内切酶的酶切位点,而且质粒上带有选择性标记位点,而且质粒是细菌原有的核外DNA可以很好地在细菌体内保留和表达

就是将目的基因片段构建到这两个载体中转入某一生物个体如大肠杆菌使目的基因在受体中表达你这两个载体不知道干嘛用的若是表达载体的话它们里边肯定含有理解用和作载体的克隆外源基因的原理百度作业帮小船出海教育科技北京有限公司百度快照好评第一节质粒载体质粒复制子拷贝数及其衍生质粒~系列质粒及其衍生二筛选标记筛选标记主要用来区别重组质粒与非重组质粒当一个外源片段第一节质粒载体百度快照好评序列在载体的位置质粒可转移性转基因细胞系制备转基因动物

pBR322质粒作为一种常用的基因克隆载体,在实际应用中有着非常重要的地位,其中一个突出的例子就是应用pBR322作为克隆载体对水稻的叶绿体光诱导基因psbA进行结构分析

(1)“pBR322”是一种质粒,其化学本质是DNA;在自然情况下,质粒可通过自我复制过程进行扩增.(2)由图可知,过程①表示从生物体细胞中分离获得目的基因;过程②中DNA连接酶的作用是将目的基因与运载体结合形成重组DNA.过程③

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