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高tm值引物好 还是低tm值引物好

引物TM是设值和合成引物时的Tm值, 也就是理论值。 而PCR产物tm值是在实际操作中摸索出来的温度值 引物Tm值与PCR产物Tm值这两个不同的引物当然退火温度也不相同,一般在设计引物的时候,程序就会显示出Tm值是多少.在做PCR的时候,将退火温度设定的稍。

引物TM是设值和合成引物时的Tm值, 也就是理论值。 而PCR产物tm值是在实际操作中摸索出来的温度值 引物Tm值与PCR产物Tm值这两个不同的引物当然退火温度也不相同,一般在设计引物的时候,程序就会显示出Tm值是多少.在做PCR的时候,将退火温度设定的稍...

你自己设计的还是找谁设计的

你的引物长度不一样吧。

1.一般来说,较低的退火温度可以提高pcr反应的敏感性但特异性较差;而较高的退火温度则可以提高pcr的特异性但却降低了扩增效率。通常引物与模板的退火温度在45-55度。 2.优化退火温度最好的方法是设置一系列对照反应,即通过在低于计算出的引物T...

退火温度与引物的TM值的关系主要和DNA聚合酶与其buffer有关。 有些退火温度要比TM低5度、3度,有些还会高3度,有些是一模一样的。主要参考不同公司所生产的DNA聚合酶的说明书。

Tm值不用那么在意,差不多就行,我一般是按照引物单上的。基本上你用不同的软件检测同一条引物就会出现不同的Tm值。Touchdown PCR最后应该在那个降低下来的最低温度上继续循环。

55°C左右吧~一般退火温度比Tm值低5度~但要确定一下你的polymerase适用的退火温度~比如pfu一般不要低于60°C~Taq不低于55°C即可~

Tm值的定义,是两段互补的碱基序列解链50%时的温度。一般的常识是,在设定PCR的program时,Tm值有非常重要的参考意义。 我们设计引物时,经常要在引物5’端加上酶切位点,保护碱基,Kozak等一大串非结合序列。 一般将公司给出的两段引物较低的一...

首先告诉你,Tm值没什么用的,你要注意的是退火温度,比如这是我做16S rDNA的程序, 1)95度 10min(这个一般用94-95度,使DNA完全分开,这步一般固定) 2)95度 30秒(94度、95度都可以,这步几乎也是固定的) 3)退火温度 30-60秒(退火温度你...

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