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多克隆位点名词解释

multiple cloning sites,MCS多个限制酶的单一切点.由许多酶切位点组成,往往是人工合成的一段外源基因的插入部位的DNA序列.高等教育出版社《生物化学》第三版 下册 584面

多克隆位点,是包含多个限制性酶切点的一段很短的DNA序列.

1单克隆就是一样的,来源于一个母体;多克隆来源于多个母体;2对于抗体来说,单克隆抗体都是一样的,来源是融合的杂交瘤细胞;多抗通过免疫动物血清纯化获得;3貌似没有单克隆位点……如果有就是指在质粒构建时插入位点

多克隆位点(multiple cloning site, MCS) ,是包含多个(最多20个)限制性酶切位点(restriction site)的一段很短的DNA序列.也称为多位点接头(polylinker),是基因工程中常用到的载体质粒的标准配置序列.MCS中,每个限制性酶切位点通常是唯一的,即它们在一个特定的载体质粒中只出现一次.

载体上含有的一个人工合成的DNA片段,其上含有多个单一酶切位点,是外源DNA的插入部位,具备条件:是载体中的一段碱基序列,由数个酶切位点组成,这些位点在载体上都是单一位点.

穿梭载体(shuttle vector)是指含有两个亲缘关系不同的复制子,能在两种不同的生物中复制的. 例如既能在原核生物中复制,又能在真核生物中复制的载体.这类载体不仅具有细菌质粒的复制原点及选择标记基因,还有真核生物的自主复制序列(ARS)以及选择标记性状,具有多克隆位点.通常穿梭载体在细菌中用于克隆,扩增克隆的基因,在酵母菌中用于基因表达分析.

表达载体(Expression vectors)就是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、RBS、终止子等),是目的基因能够表达的载体.如表达载体pKK223-3是一个具有典型表达结构的大肠杆菌表达载体.其基本骨架为来自pBR322和pUC的质粒复制起点和氨苄青霉素抗性基因.在表达元件中,有一个杂合tac强启动子和终止子,在启动子下游有RBS位点(如果利用这个位点,要求与ATG之间间隔5-13bp),其后的多克隆位点可装载要表达的目标基因.

抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(Monclone antibody).由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体 抗血清(antiserum)是一种含有多克隆抗体的血清.通过注射抗血清可以传递被动免疫(passive immunity)治疗许多疾病.

单一酶切位点就是只有一种特定的酶能够识别并进行酶切的位点,多克隆位点一般是位于质粒上的一段序列,这段序列含有很多个酶切位点,但这些酶切位点每一个都被一种酶识别并酶切.

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